+7 (915) 545 17 65

info@inanalytica.com
Корзина
В каталог

5,5′-Дитиобис(2-нитробензойная кислота) (Реактив Эллмана), ≥98%, BioReagent, 1 г, Sigma-Aldrich/Merc

Merc
D8130-1G
В корзину
5,5′-Дитиобис(2-нитробензойная кислота), или Реактив Эллмана (DTNB) (каталожный номер Sigma-Aldrich: D8130-1G) — это высокочистый химический реагент в уменьшенной фасовке 1 грамм. Он предназначен для количественного колориметрического определения свободных сульфгидрильных (тиоловых, -SH) групп в белках, пептидах и малых молекулах.
Эта фасовка идеально подходит для лабораторий с небольшим или периодическим потоком анализов, так как позволяет использовать свежий реагент и минимизирует риски его порчи при длительном хранении. Квалификация BioReagent подтверждает его пригодность для высокоточных биохимических и клеточных исследований.


Химический механизм и принцип метода
Реактив Эллмана представляет собой симметричный дисульфид. При добавлении к образцу, содержащему тиолы (R-SH) в слабощелочной среде (оптимально pH 8.0), происходит быстрый тиол-дисульфидный обмен:
  1. Молекула DTNB расщепляется, связываясь с аналитом.
  2. Высвобождается сильно окрашенный желтый анион — 2-нитро-5-тиобензоат (TNB²⁻).
  3. Оптическая плотность раствора измеряется на спектрофотометре или планшетном ридере при длине волны 412 нм. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству тиоловых групп (коэффициент молярной экстинкции \(\varepsilon = 14\,150 \text{ M}^{-1}\cdot\text{см}^{-1}\)).


Основные области применения
  • Тест Эллмана на активность ферментов: Определение кинетики и активности ацетилхолинэстеразы (АХЭ) и бутирилхолинэстеразы в нейробиологии и фармакологии.
  • Анализ окислительного стресса: Измерение концентрации восстановленного глутатиона (GSH) в плазме, тканях и клеточных лизатах.
  • Характеристика белков: Подсчет доступных (поверхностных) остатков цистеина в нативной структуре протеинов или общего их числа после денатурирования (например, мочевиной или гуанидингидрохлоридом).


Технические характеристики
  • Каталожный номер: D8130-1G.
  • Фасовка: 1 грамм (кристаллический порошок от светло-желтого до зеленовато-желтого цвета).
  • Химическая формула: \(C_{14}H_8N_2O_8S_2\).
  • Молекулярная масса: 396.35 г/моль.
  • Регистрационный номер CAS: 69-78-3.
  • Чистота: \(\ge 98\%\) (методом ТСХ/ВЭЖХ).
  • Растворимость: Растворим в этаноле и водных буферах (для ускорения растворения в воде рекомендуется сначала сделать концентрат в фосфатном буфере с pH 7.0–8.0).


Ключевые преимущества фасовки 1 г
  • Защита от гидролиза: DTNB очень чувствителен к влаге воздуха. Маленькая фасовка снижает риск деградации всей массы реагента из-за частого открывания банки.
  • Экономическая выгода: Оптимальный выбор для краткосрочных исследовательских проектов или валидации новых лабораторных методик.
  • Высокая селективность: Не реагирует с другими функциональными группами аминокислот при соблюдении правильного pH.


Правила хранения и работы
  • Условия хранения: Строго в холодильнике при температуре от +2°C до +8°C, в защищенном от света месте. Банка должна быть плотно укупорена.
  • Особенности приготовления: Рабочие растворы DTNB относительно нестабильны и склонны к самопроизвольному гидролизу со временем. Рекомендуется готовить свежий рабочий раствор непосредственно в день проведения анализа.

Страна: Германия

Категория: Химические реактивы